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WAKO的產(chǎn)品介紹

發(fā)布時(shí)間： 2024-12-03　　點(diǎn)擊次數(shù)： 81次
CEPT是美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院（NIH）開(kāi)發(fā)的小分子混合物。由4種成分組成，并取其組成成分（Chroman 1、Emricasan、Polyamines、Trans-ISRIB）的開(kāi)頭字母命名為“CEPT"。


研究表明，CEPT可防止人ES/iPS細(xì)胞（人多能干細(xì)胞：hPSCs）在細(xì)胞傳代中的細(xì)胞應(yīng)激和DNA損傷1）。與強(qiáng)效ROCK抑制劑Y-27632相似，可提高細(xì)胞傳代和凍存時(shí)hPSCs的存活率。

此外，與基于hPSCs的胚狀體和類(lèi)器官形成、單細(xì)胞克隆和基因編輯等干細(xì)胞研究中所用的現(xiàn)有培養(yǎng)方法相比，CEPT還可改善細(xì)胞存活率1,2,3）。

FUJIFILM Wako已上線經(jīng)無(wú)菌測(cè)試且無(wú)需制備的即用型CEPT Cocktail溶液。本產(chǎn)品為經(jīng)過(guò)濾器滅菌的溶液，可直接添加至培養(yǎng)基使用。有助于再生醫(yī)療研究。

參考文獻(xiàn)
1）Chen, Y. et al. : Nat. Methods, 18(5), 528 (2021).
2）Tristan, C.A. et al. : Stem Cell Reports, 16, 3076 (2021).
3）Tristan, C.A. et al. : Nat.Protoc., 18, 48 (2022).

WAKO的產(chǎn)品介紹

◆特點(diǎn)
● 從DNA損傷等細(xì)胞應(yīng)激中保護(hù)ES/iPS細(xì)胞，維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能
● 已進(jìn)行過(guò)濾滅菌的即用型混合溶液
● 已通過(guò)內(nèi)毒素測(cè)試以及支原體陰性檢測(cè)的CultureSure系列

◆測(cè)試項(xiàng)目
● 濃度（HPLC）：已通過(guò)測(cè)試
● 外觀：液體
● 內(nèi)毒素：<3 EU/mL
● 已完成無(wú)菌測(cè)試
● 已完成支原體陰性測(cè)試

◆使用方法
以1/1,000的量添加本品至培養(yǎng)基，充分混合后使用。
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※使用注意
● 本產(chǎn)品為凍存品（-20°C）。為避免反復(fù)凍融，建議根據(jù)使用量分裝凍存。
● 溶解時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)沉淀，并非產(chǎn)品質(zhì)量問(wèn)題，請(qǐng)直接使用。（沉淀于37°C下靜置1~2 h可能會(huì)溶解，請(qǐng)避免反復(fù)冷凍和加熱。）
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◆適用范圍
樣品：人ES/iPS細(xì)胞
應(yīng)用：
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◆性能數(shù)據(jù)
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure®   hPSC Δ培養(yǎng)基，在37°C，5% CO2的條件下培養(yǎng)人iPS細(xì)胞201B7株（6孔板 1 well=9.5cm2）。

培養(yǎng)經(jīng)過(guò)16 h以后，更換不含CEPT或Y-27632的培養(yǎng)基，每2~3天更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。

培養(yǎng)第8天時(shí)，確認(rèn)細(xì)胞后，使用4%多聚甲醛固定細(xì)胞，ALP染色后，計(jì)數(shù)細(xì)胞集落。
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單細(xì)胞克隆測(cè)試
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure® hPSC Δ培養(yǎng)基，在37°C，5% CO2的條件下培養(yǎng)人iPS細(xì)胞201B7株（96孔板）。

培養(yǎng)經(jīng)過(guò)16 h以后，更換不含CEPT或Y-27632的培養(yǎng)基，每2~3天更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。

培養(yǎng)第13天時(shí)，確認(rèn)細(xì)胞后，使用4%多聚甲醛固定細(xì)胞，ALP染色后，計(jì)數(shù)形成細(xì)胞集落的孔數(shù)與空孔數(shù)。

通過(guò)所有孔數(shù)與細(xì)胞集落形成孔數(shù)之比，計(jì)算細(xì)胞集落形成率。
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【結(jié)果】
細(xì)胞接種數(shù)少時(shí)，添加CEPT的組比添加Y-27632的組形成的細(xì)胞集落更多。

未分化人iPS細(xì)胞的維持確認(rèn)
【細(xì)胞株】人iPS細(xì)胞201B7株
【培養(yǎng)基】StemSure® hPSC培養(yǎng)基Δ+35 ng/mL bFGF
Red：rBC2LCN-635（人iPS細(xì)胞膜染色）
Blue：DAPI (細(xì)胞核染色)
※ BC2LCN是一種對(duì)存在與人ES/iPS細(xì)胞的膜表面的糖鏈具有高親和性的重組凝集素
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【結(jié)果】
添加CEPT時(shí)與添加Y-27632時(shí)都未觀察到細(xì)胞形態(tài)的差異，均可確認(rèn)未分化維持狀態(tài)。

◆產(chǎn)品列表
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※ 僅供實(shí)驗(yàn)研究用，不可用于臨床診斷。

 

 

 

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